
本篇文章讲解关于乳酸菌检测用培养基及生化反应详解和测评乳酸菌身体乳的方法的相关题,希望能帮助到大家。
1、乳酸菌简介乳酸菌是一类能发酵糖类并产生大量乳酸的无芽孢革兰氏阳性菌的俗称。主要属有乳杆菌属、双歧杆菌属、嗜热链菌属、明串珠菌属和片菌属。
乳酸菌有多种细胞形状,有长杆状、弯杆状或短杆状。
双歧杆菌呈短棒状、细棒状或形,可形成各种分枝或分枝点以及Y形、V形、弧形、匙形等其他形状。它的典型外观是分枝杆菌,因此得名分枝杆菌。双歧杆菌,不耐酸,强度也不是很强。
嗜热链菌细胞呈形、椭圆形或棒状,直径0520m,成对或链状排列。
2、检验标准及程序
《GB478935-2016食品安全国家标准食品微生物检验乳酸菌检验》规定了乳酸菌检验程序如下。
图4乳酸菌测试流程
该测试过程总共涉及三种类型的培养基,本文将详细讨论。
三、主要培养基1、MRS培养基本产品主要用于食品中乳酸菌的分离、培养和计数。
培养基的组成如下。
蛋白胨
100
牛肉浸粉
50
酵母浸粉
40
葡萄糖
200
磷酸二钾
20
柠檬酸三铵
20
乙酸钠
50
硫酸镁
02
硫酸锰
005
琼脂
150
双80
10
pH值6202
25
原理蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子,葡萄糖为发酵糖,磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂,柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰和Tween-80提供醋酸钠提供培养各种乳酸菌所必需的生长因子,其成分抑制特定细菌并中和细胞性物质,为乳酸菌提供良好的生长环境。琼脂是培养基的凝固剂。使用说明称取本品662g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,加入等份,121高压灭菌15-20分钟,单独保存。质控按照标签说明配制培养基,接种质控菌,361需氧培养482小时,观察结果。
表1各质控菌株在MRS培养基上的生长要求
2.莫匹罗星锂盐和盐酸半胱氨酸改良MRS培养基顾名思义,MRS培养基是通过添加特定成分进行改良的培养基。基础与MRS相同,可以使用HB0384-5或HB0384-6,每200mL培养基中加入10mg过滤灭菌的莫匹罗星锂盐和01g半胱氨酸盐酸盐。使用Hyvo产品时,实际用量为莫匹罗星锂盐1小瓶/100mL,盐酸半胱氨酸1小瓶/200mL。原理莫匹罗星是一种抗生素,主要用于杀灭皮肤表面的革兰氏阳性菌,对部分革兰氏阴性菌也有一定的抗菌作用。添加到该培养基中,可抑制乳酸杆菌、嗜热链菌等病菌的生长。
L-半胱氨酸是一种具有生理功能的重要物质,广泛存在于自然界中。是动植物各种组织细胞防御有害物质、增加活力所利用的氨基酸,是唯一含有硫醇-SH的氨基酸,促进蛋白质合成、生长、脂肪分解,增加活性。添加到本产品中,可以保持培养基的低氧化还原电位,促进厌氧菌双歧杆菌的生长。
使用说明称取本品662g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,等分,121高压灭菌15-20分钟,冷却至48左右,每200mL加入过滤灭菌的Mupiro。每个培养基混合10毫克锂盐和01克盐酸半胱氨酸,倒入无菌培养皿中,单独保存。质量控制按照标签用途配制培养基,接种下述质控菌株,361厌氧培养482小时,观察结果。
表2每种质量控制菌株在改良MRS培养基上的生长要求。
图8各质控菌株在改良MRS培养基上的生长状态。
3、MC琼脂培养基该培养基主要用于测定食品中的嗜热链菌总数。
成分g/L如下
大豆蛋白胨
50
牛肉浸粉
30
酵母浸粉
30
葡萄糖
200
乳糖
200
碳酸钙
100
琼脂
150
中性红
005
pH值6001
25
原理大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉可以提供氮源、维生素和生长因子,葡萄糖和乳糖为可发酵糖提供碳源,乳酸菌发酵糖在菌落周围产生碳酸钙,溶解产生酸。鉴定乳酸菌。琼脂是培养基中的凝固剂,中性红是pH指示剂。使用说明称取本品800g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,单独保存。质控按照标签用途配制培养基,接种下述质控菌株,361有氧培养482小时,观察结果。
表3各质控菌株在MC琼脂上的生长要求。
4、乳酸菌的生化鉴定有时需要对接种或分离的菌株进行额外的鉴定,以确认细菌的类型和纯度,乳酸菌最常用的生化鉴定方法是生化反应。下面,我们一一讲解各种乳酸菌的三种生化反应。相关表格引用自《GB478935-2016食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》和《GB478934-2016食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌检验》。1、乳酸菌的碳水化合物反应一般乳酸菌的碳水化合物反应标准及现象见表4。
2.嗜热链菌的生化反应表5显示了一般嗜热链菌的主要生化反应标准和现象。表5典型嗜热链菌主要生化反应
3、双歧杆菌主要生化反应一般双歧杆菌主要生化反应标准及现象见表6。表6常见双歧杆菌主要生化反应
5、注意事项乳酸菌检测时需要注意两点一是样品处理方法,二是生化检测内容。1.样品稀释时,按照现有剂量进行。即,将250g/mL样品加入到225g/mL盐水溶液中进行稀释。但冷冻样品必须先解冻再稀释,标准中明确规定了解冻方法,要求25解冻需在18小时或4515分钟内完成。步。2、生化反应过程中,必须注意以下几点细菌接种必须是培养基平板上纯培养新鲜培养物石蜡覆盖标准规定厌氧菌应加液体石蜡后培养,但在实践表明,无论有条件厌氧菌还是专性厌氧菌,有无测试石蜡,结果都是一致的,这并不影响结果的判断,所以操作时请尽量按照标准要求进行。潜伏时间通常18小时后即可观察到结果,如果现象不明显,可适当延长至24小时。标准对比对于某些生化反应,即使标准中列出了阳性或阴性反应,在实际测试中也可能得不到这些结果。这意味着无法满足100%的标准。这不是生物化学中的题。由于标准中描述的阳性和阴性反应均在90多个菌株的范围内,并非绝对所有菌株都能实现该反应,因此产品偏差可能是由于菌株差异造成的。对这些间歇性发生的现象应合理处理,并根据情况选择不同的鉴定方法来交叉检验鉴定结论。
图10生化反应符合标准注意事项
附加说明
该标准涵盖了很多内容,此列表列出了一些常见的内容。具体计算方法和培养基的选择题将在后续文章中讨论。
《GB478935-2016乳酸菌检验》-标准下载
《GB478934-2016双歧杆菌检验》-标准下载
注本文为海博生物原创,未经许可不得使用。
一、乳酸菌奶喝了好不好?
1、营养丰富乳酸菌奶含有蛋白质、脂肪、肠道乳酸菌、钙等营养成分,适量食用可以补充营养。
2、调节胃肠菌群乳酸菌奶中的肠道益生菌可以调节胃肠菌群,保护胃肠道,促进消化和肠道蠕动。
3、提高免疫力饮用乳酸奶可以提高免疫力和抗病能力,保持身体健康。
二、gik水润乳酸菌精华素使用方法?
如何使用极客保湿乳酸菌精华
清洁肌肤并均匀涂抹爽肤水后,使用Gique保湿乳酸菌精华。柔肤水是一款适合亚洲人肌肤的产品,有助于在肌肤上形成皮脂膜,有效吸收水分,去除老旧角质,帮助精华液的营养成分被肌肤吸收。它更完全、更直接地渗透到皮肤更深处,使皮肤更柔软、更有弹性。
晚上睡觉前,取少量均匀涂抹于洁净的面部,轻轻按摩几分钟,直至精华液被吸收。
基本的按摩手法是以向上、由内向外的螺旋运动反复按摩关键部位。精华液应该在脸上停留至少20分钟,让营养成分被皮肤吸收,然后冲洗掉。
三、乳酸菌和乳双歧杆菌的区别?
首先,双歧杆菌和乳酸菌的性质完全不同,乳酸菌是指能够发酵糖的细菌,包括乳酸菌和酵母菌,双歧杆菌是益生菌的一种,双歧杆菌促进人体发育,可以提高免疫力,延缓身体衰老等。很多人认为双歧杆菌的数量是健康的标志,但当你生病时,体内双歧杆菌的数量就会减少。

