不少人都关注身体乳mem和一些细胞培养的实验报告?的话题,但是大家不了解,接下来听小编的讲解吧!
细胞培养的实验报告?
实验细胞培养1实验目的初步掌握哺乳动物细胞原代培养和传代培养的基本操作流程,为生物工程在医学上的应用奠定基础。
2、实验原理从生物体中取出某种组织或细胞,模拟体内的生理条件,使其在人工培养条件下生存、生长、繁殖或传承。这个过程称为细胞培养。细胞培养技术最大的优势在于它可以让我们直接观察活细胞并在受控的环境条件下进行实验,避免了体内实验中的许多复杂因素,并且还可以与体内实验相辅相成,可以提供大量的数据。同时存在的活细胞数量。具有相同性状的细胞作为研究对象更便宜、更经济,因此成为生物学研究的重要手段。近年来,它被广泛应用于体细胞遗传、分化、胚胎发生、肿发生、免疫学、细胞工程、放射生物学和老年学等一系列研究领域,并取得了丰硕的成果。细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获得的组织细胞作为原代培养物首次培养;当原代培养的细胞增殖到一定密度时,需要重新培养,即培养的细胞分散后,按1:2或其他的比例从一个容器中培养转移到另一个或几个容器中扩大培养,进行传代培养,累计传代次数即为细胞的代数。细胞培养是一项程序复杂、要求多而严格的实验工作。所有分离细胞的生长均受温度、渗透压、pH值和无机盐的影响。消和配液都有严格的规范和要求,尤其是无菌操作是细胞培养成功的关键。3实验耗材31材料与标本小兔、HeLa细胞、人宫颈细胞32设备与仪器手术器械、平板、培养瓶、吸管、灭菌后使用的离心管、酒精灯、烧杯、超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜。23试剂MEM培养液含5%小牛血清、0.01mol/LPBS、0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA混合消化液、75%乙醇。4实验方法41原代细胞培养411原理细胞培养细胞培养是模拟体内生理条件,将细胞取出体外,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传承,进行的过程细胞生命、细胞变、细胞工程等题的研究。近年来,它已广泛应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿学、细胞工程等领域,并已发展成为一项重要的生物技术,取得了令人瞩目的成就。直接从体内取出的组织或细胞进行培养称为原代培养。原代培养细胞在体外的时间较短,性质与体内相似,适合研究。一般来说,未成熟状态的组织细胞,如动物胚胎、幼体器官等,更容易进行原代培养。412操作。收集兔子并很快因颈椎脱位而死亡。然后,将整个动物浸入装有75%乙醇的烧杯中几秒钟灭菌,取出,放在大盘子中,搬入超净工作台。用消剪刀剪开用碘酊和乙醇再次消的皮肤,剖腹取出肝脏或肾脏。放入无菌盘中。.切割用灭菌的PBS溶液将摘除的器官清洗3次,然后用眼科手术剪反复仔细切割组织,直至成为约1mm3的小片,然后用PBS清洗直至组织片变白。将其转移至无菌离心管中,静置几分钟,使组织碎片自然沉降到管底部,然后弃去上清液。.消化、接种及培养取025%胰蛋白酶-002%EDTA混合消化液1ml,放入离心管中,与组织块混匀,加管塞,37水浴消化8-10分钟,每隔几分钟摇动,使组织与消化液充分接触,静置,吸去上清,向离心管中加入5-10ml含5%小牛血清的MEM培养基,用离心管吹混。吸管,转移至两个培养瓶中,在二氧化碳培养箱中培养。413结果细胞通常可以在接种后几小时内粘附在壁上并开始生长。如果接种细胞密度合适,5天至一周即可形成单层。42传代细胞培养421原理体外培养的原代细胞或细胞系必须进行传代培养,才能获得稳定的细胞系或大量同类型的细胞,并维持细胞类型的延续。
培养细胞形成单层汇合后,因密度过大、生存空间不足而造成营养消耗。将培养的细胞打散,从容器中取出,按照1:2或1:3的比例转移到另一个容器中进行培养,即传代培养。细胞的“一代”是指从细胞接种到分离和再培养的时期,与细胞一代或倍增不同。在一代中,细胞培养3至6次。传代后,细胞通常经历三个阶段游离期、指数生长期和停滞期。细胞分裂指数常用来表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群/100个细胞的分裂期数。一般细胞分裂指数在0.2%~0.5%之间,肿细胞可达3~5%。细胞接种后2-3天,分裂增殖旺盛,是细胞活力最好的时期。称为指数生长期的对数生长期,适合各种实验。422操作。从二氧化碳培养箱中取出原代培养细胞或生长成单层的HeLa细胞,倒出超净工作台中瓶内培养液,加入少许消化液。建议液面覆盖细胞并静置5-10分钟。倒置显微镜下观察消化后的细胞。如果细胞变圆,不再相互连接,则立即将消化液倒出超净台,加入3-5ml新鲜培养基,吹打,制成细胞悬液。.吸出约2ml细胞悬液,加入另一个培养瓶中,每瓶加入约3ml培养液,盖上瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续培养。423结果一般情况下,传代细胞约2小时即可贴壁,24天后在培养瓶内形成单层,需再次传代。43设备及液体配制注意事项及无菌操作431设备及液体配制细胞培养用玻璃仪器,如培养瓶、吸管等,清洗干净后分装于铝盒、铁筒中,120,2干烤放置1小时,消备用;手术器械、瓶塞、配制好的PBS溶液放入15磅灭菌锅中灭菌,蒸汽灭菌20分钟;MEM培养液、小牛血清、消化液用G6过滤器负压过滤备用。432无菌操作时的注意事项无菌操作时,工作区域必须保持无菌、清洁。因此,操作前请仔细洗手并用75%乙醇消。作业前20-30分钟,启动超净台鼓风机。操作过程中严禁说话,严禁用手直接取用无菌物品,如瓶塞等,而应使用器械,如止血钳、镊子等取用。培养瓶只能在超净工作台中打开。开封前,应先用乙醇对瓶口进行消。开封后、装塞前,应将瓶口放在酒精灯上灼烧。内部完成。操作完成后,加一个瓶塞,将其从超净台上取出。用过的吸管从消后的铁筒中取出后,用手握住末端,将尖端放在火上烧焦,套上橡胶奶嘴,然后吸出液体。总之,整个无菌操作过程应围绕酒精灯进行。五、实验报告1、原代细胞培养和传代细胞培养有什么区别?2总结一下自己的经验,如何快速、保证无菌操作。
如何巧背元素周期表啊?
记住元素周期表可以帮助您记住
1、掌握元素周期律元素周期表由水平周期和垂直周期组成。水平周期上的元素具有相似的电子层结构,而垂直周期上的元素具有相似的化学性质。了解这些规律将有助于你更好地理解和记忆背诵过程中要素的排列。
2了解元素的分组元素周期表中的元素根据其化学性质分为不同的族,如碱金属、碱土金属、过渡金属等。了解这些族的名称和特征有助于分类当你背诵这些元素时。
3、制定记忆计划将元素周期表分成小部分进行记忆,每天集中记忆一小部分,直到记住所有元素。每天记忆的数量可以根据自己的能力和时间安排来确定。
4.创建关联和提示将元素的符号、原子序数和名称与一些关联或提示联系起来,有助于记忆。例如,您可以将符号C与“炭疽”相关联,将符号Hg与“水气、邪恶、赤心”等相关联。
5复习巩固记忆元素周期表是一个长期的过程,反复复习非常重要。定期复习和复习已经学过的内容,同时继续背诵新的内容。
最重要的是,在背诵过程中要有耐心和坚持。请记住,这需要时间和精力,但是通过不断的练习和复习,您将逐渐掌握元素周期表。
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